ESI 蛋白质完整分子量检测
技术介绍
电喷雾电离(Electrospray ionization, ESI)质谱是一种软电离技术,可以产生带多个电荷的气相离子,从而减小被测分子的质荷比范围,使得10-200KDa的蛋白质分子可以在500-5000之内的质荷比范围内能被检测。相比MALDI测蛋白质完整分子量,ESI-LCMS准确度更高,在10-200KDa的蛋白质,误差范围基本在1-4Da,ESI得到的质荷比离子图谱较为复杂,往往需要专门的去卷积软件,经过处理计算后才能得到蛋白质的完整分子量,不能直观得到;ESI-LCMS具有更高的灵敏度,一次分析只需要1-5ug左右的样品。
图 1 电喷雾电子化原理图
Figure 1 Schematic Diagram of Electronic spray
分析仪器
图 2 Q-Exective LC-MS 示意图
Figure 2 Schematic diagram of Q-Executive LC-MS
应用范围
样品要求
样品状态 | 多肽/蛋白干粉,溶液 |
样品量 | 5-100ug |
纯度 | 50%以上 |
注意事项 | 溶液样品不能含有SDS;若含有PBS等其它盐类,Triton-X,Tris和其他污染物,需另外收取样品除盐处理费用。 |
运输方式 | 干冰或者冰袋运输 |
案例分析
交付内容
1).质谱原始文件; 2).质量峰图(每个样品3张); 3).实验方法与结果报告
参考文献
1).Wang D, Yu M, Liu N, et al. A sulfonium tethered peptide ligand rapidly and selectively modifies protein cysteine in vicinity. Chem Sci. 2019;10(19):4966-4972. (合作文章)