蛋白质组学

MALDI-TOF蛋白质分子量检测

icon1.png  技术介绍
MALDI-TOF(matrix assisted laser desorption/ionization MALDI)一种基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱检测技术,与ESI(电喷雾)离子化技术一样都是一种软电离技术。MALDI分析容易得到分子离子峰,因此在多肽,蛋白质分析中得到广泛应用。

原理是样品与小分子基质(大部分为有机酸,如CHCA, DHB,THAP等)进行混合,在不锈钢靶盘的加样孔上干燥后,送入离子源腔体,激光器发射特定波长激光(如355nm)照射在样品与基质的混合物中,大部分能量被基质小分子吸收再均匀的传递给样品,使样品瞬间气化和离子化。

MALDI最大的优势有:
(1)分子量5KD以下物质一般只带一个电荷,分子量100KD也只带1-4个电荷左右,图谱解析较非常简单直观。飞行时间(time of flight,TOF),是一种质量分析器技术。在质谱仪中,TOF质量分析器通过测量离子飞过给定飞行距离所用的时间来计算离子的质量,经过多级反射技术,TOF分辨率也可以达到20000-40000的高分辨率。
(2)MALDI-TOF检测具有操作简单、灵敏度高、分辨率高、分析速度快、质量精度高以及对样品中的盐等杂质有一定的容忍性等特点。非常适合分析一些纯度较高,比较单一的样品,比如合成多肽,表达纯蛋白确证。


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icon2.png  分析仪器
MALDI-TOF/TOF 5800

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icon3.png  应用范围
1)化学合成/纯化多肽;2)多肽酶解物分子量范围分布;3)蛋白质肽指纹图谱(PMF);4)重组蛋白表达确证。

icon4.png  样品要求

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icon5.png  案例分析
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icon6.png  交付内容
1).质谱原始文件;2).质量峰图(每个样品3张);3).实验方法与结果报告
icon7.png  参考文献

1. He W, Li S, He K, et al. Identification of potential allergens in larva, pupa, moth, silk, slough and feces of domestic silkworm (Bombyx mori). Food Chem. 2021;362:130231.(客户文章)

2. Cheng G, Li SM, Wang Y, Wang ZG, Zhang JL, Ni JZ. REPO4 (RE = La, Nd, Eu) affinity nanorods modified on a MALDI plate for rapid capture of target peptides from complex biosamples.Chem Commun (Camb). 2013;49(76):8492-8494.