生物药质谱表征

ADC 药物 DAR 值分析

技术介绍
很多抗体药物偶联物(ADC)的主要药物偶联氨基酸为半胱氨酸,而半胱氨酸形成的二硫键又是维持轻链之间,重链之间,轻链与重链之间的重要方式。因此抗体药物偶联分析包括了在变性(有机溶剂)条件下和保持非共价相互作用的完整抗体形态的非变性条件下的完整分子量分析。通过计算不同偶联药物的蛋白的完整分子量的相对丰度,可以计算出平均DAR值。通过肽图分析可以具体确定偶联肽段的氨基酸位点。


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参考文献

1. Janin-Bussat MC, Dillenbourg M, Corvaia N, Beck A, Klinguer-Hamour C. Characterization of antibody drug conjugate positional isomers at cysteine residues by peptide mapping LC-MS analysis. J Chromatogr B Analyt Technol Biomed Life Sci. 2015 Feb 15;981-982:9-13.

2. Debaene F, Boeuf A, Wagner-Rousset E, Colas O, Ayoub D, Corvaïa N, Van Dorsselaer A, Beck A, Cianférani S. Innovative native MS methodologies for antibody drug conjugate characterization: High resolution native MS and IM-MS for average DAR and DAR distribution assessment. Anal Chem. 2014 Nov 4;86(21):10674-83.