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生物药质谱表征


肽图分析

技术介绍


        肽图是蛋白质氨基酸序列分析、翻译后修饰以及序列变异鉴定的最重要的分析方法。与Edman测序法不同，肽图只需要分析肽段质量，然后与理论肽段质量相比对，即可推算目标蛋白的特征与序列。肽图分析需首先使用蛋白酶将蛋白酶切成肽段，然后使用反相色谱对多肽进行分离，最后用质谱分析即可得到多肽指纹图谱。通过肽图分析我们可以对蛋白质药物N/C端异质性进行分析，确认蛋白序列及序列覆盖度，鉴定翻译后修饰位点及修饰比例，鉴定序列变异体。Trypsin是肽图分析中最常用的蛋白酶，但是单一Trypsin酶切肽图难以达到100%序列覆盖度，我们使用多酶配合的方法达到100%的序列覆盖度。除序列覆盖度外，肽图另一个重要的作用就是通过MS/MS鉴定翻译后修饰位点和氨基酸序列变异。


        微纳菲生物目前已经建立了完善的肽图分析方法，满足肽图序列覆盖度分析，蛋白质药物序列变异分析以及翻译后修饰分析。


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结果展示


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                                                                                    LC-MS/MS肽图总离子流峰图




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                                                                                                     肽图分析结果




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                                                                                       抗体重链N端焦谷氨酸环化修饰

样品要求

样品类型

样品要求

液体

200ug （需提供理论序列）

1.蛋白质药物N/C端测序（MS/MS）

2.蛋白序列覆盖度：两种或两种以上蛋白酶，提供100%序列覆盖度

3.翻译后修饰位点及修饰比例分析

4.序列变异分析

5. 尽量以蛋白质溶液的方式提供样品，干冰运输