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磷酸化

磷酸化

修饰蛋白质组

产品简介

磷酸化修饰（Phosphorylation）是细胞内最关键的翻译后调控机制之一，由蛋白激酶将ATP/GTP的磷酸基团转移至底物蛋白的丝氨酸、苏氨酸或酪氨酸残基，并由磷酸酶催化去磷酸化，这一可逆过程是DNA损伤修复、信号转导、细胞凋亡等生理活动的核心调控开关。该修饰异常与肿瘤发生发展、神经退行性疾病、代谢紊乱及免疫失调等密切相关，已成为疾病机制研究与靶向药物开发（如激酶抑制剂）的重要切入点。基于质谱的磷酸化组学技术通过检测79.97Da的特征质量偏移，可实现对磷酸化肽段及位点的高通量、高灵敏度鉴定，为精准解析激酶信号网络、发现疾病生物标志物及药物靶点提供强有力的工具支撑。

技术流程




技术流程

图1.磷酸化修饰组学技术路线示意图

磷酸化富集方法

磷酸化富集方法主要包括：

  1. 固定化金属离子色谱（IMAC）
  2. 金属氧化物色谱（MOAC）
  3. Phos-Tag功能化材料
  4. 亲和富集法
  5. 化学标记法以及商业化富集试剂盒

微纳菲生物公司针对组学样品采用IMAC法富集磷酸肽，针对IP样品或胶条等微量样品采用TiO2法富集磷酸肽。

图2.常见磷酸化富集方法@2x.jpg

图2.常见磷酸化富集方法

案例应用

英文标题：Determining the ERK-regulated phosphoproteome driving KRAS-mutant cancer

影响因子：45.8

发表期刊：Science

研究内容：该研究系统性地绘制了ERK激酶在KRAS突变癌症中的全磷酸化蛋白质组图谱。ERK是MAPK信号通路的核心效应激酶，而KRAS突变是多种实体瘤中最常见的致癌驱动突变。研究团队通过定量磷酸化蛋白质组学技术，全面鉴定了ERK直接调控的磷酸化底物，揭示了ERK信号网络在KRAS突变癌症中的关键驱动机制，为开发针对KRAS-ERK通路的精准治疗策略提供了重要的分子靶点图谱。

案例应用

送样要求

样本
细胞常规动物组织（脑、肝、脾、肺、肾、肌肉等）
规格
50mg-1g
样本
植物组织（叶、花等）
规格
0.5-5g
样本
细胞
规格
2-5*10^7

参考文献

[1]

Klomp JE, Diehl JN, Klomp JA, Edwards AC, Yang R, Morales AJ, Taylor KE, Drizyte-Miller K, Bryant KL, Schaefer A, Johnson JL, Huntsman EM, Yaron TM, Pierobon M, Baldelli E, Prevatte AW, Barker NK, Herring LE, Petricoin EF 3rd, Graves LM, Cantley LC, Cox AD, Der CJ, Stalnecker CA Determining the ERK-regulated phosphoproteome driving KRAS-mutant cancer Science, 2024 Jun;7;384(6700):eadk0850.DOI: 10.1126/science.adk0850. Epub 2024 Jun 7. PMID: 38843329; PMCID: PMC11301400

[2]

Ruprecht B, Koch H, Medard G, Mundt M, Kuster B, Lemeer S Comprehensive and reproducible phosphopeptide enrichment using iron immobilized metal ion affinity chromatography (Fe-IMAC) columns Mol Cell Proteomics, 2015 Jan;14(1):205-15.DOI: 10.1074/mcp.M114.043109. Epub 2014 Nov 13. PMID: 25394399; PMCID: PMC4288255

[3]

Mertins P, Tang LC, Krug K, Clark DJ, Gritsenko MA, Chen L, Clauser KR, Clauss TR, Shah P, Gillette MA, Petyuk VA, Thomas SN, Mani DR, Mundt F, Moore RJ, Hu Y, Zhao R, Schnaubelt M, Keshishian H, Monroe ME, Zhang Z, Udeshi ND, Mani D, Davies SR, Townsend RR, Chan DW, Smith RD, Zhang H, Liu T, Carr SA Reproducible workflow for multiplexed deep-scale proteome and phosphoproteome analysis of tumor tissues by liquid chromatography-mass spectrometry Nat Protoc, 2018 Jul;13(7):1632-1661.DOI: 10.1038/s41596-018-0006-9. PMID: 29988108; PMCID: PMC6211289

深圳市微纳菲生物技术有限公司

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