产品简介
蛋白质的糖基化是一种最常见的蛋白翻译后修饰，是在糖基转移酶作用下将糖类转移至蛋白质和蛋白质上特殊的氨基酸残基形成糖苷键的过程。蛋白质的糖基化类型主要可分为两种：N-糖基化和O-糖基化， N糖基化有固定的motif：N-X-S/T, O糖基化没有固定的motif，一般是修饰在S或者T氨基酸上面，O糖基化常常在比较连续的S和T氨基酸上发生修饰，需用用EthCD或者ETD来分析糖肽序列从而确定O糖基化位点。目前已上市的生物药中70%以上都是糖蛋白，蛋白的糖基化修饰会对蛋白质药物的药效和安全性产生重要影响，甚至影响药物在体内的药代动力学和药效学特征，因此糖基化修饰通常被列为蛋白质药物的关键质量属性，在工艺开发工程中需要重点关注。
糖基化修饰分析
糖基化修饰分析主要包括3个方面：
（1）糖基化位点的鉴定：N-糖基化位点鉴定通常使用PNGase F 酶在在18O水中进行酶切，使去糖基化位点含有1 个18O，形成+2.9890Da，可与天然脱氨基区分，确定糖基化位点。
（2）完整糖肽分析：糖肽分析能同时鉴定糖基化位点和解析寡糖链结构，并获得位点特异性糖链信息，即微观不均一性，糖肽分析需要专门的分析软件。
（3）寡糖链分析：N-糖链（由天冬酰胺连接寡糖）结构分析包括PNGase F酶切释放寡糖链、2-AB标记等苯胺或杂环化合物、液相色谱荧光检测或者液质联用分析。
抗体的N糖基化修饰
1. 糖基化修饰位点
糖基化修饰位点分析流程
蛋白N糖基化修饰位点YFN(+2.99)SSFTSIWIPYC(+57.02)IK
2. 完整糖肽分析
完整糖肽序列分析流程
糖肽MS/MS二级质谱图
各种糖基化修饰相对定量（峰面积）
3. 寡糖链分析
寡糖链修饰分析流程及结果
2-AB 标记的 Rituxan N-糖 HILIC-UHPLC 荧光谱图
深圳市微纳菲生物技术有限公司
创新质谱与人工智能技术，为生命科学研究提供蛋白代谢质谱多组学解决方案，赋能生物与医药大健康产业发展。
